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海帶含有豐富的褐藻膠、甘露醇、蛋白質(zhì)、碘、鈉、鉀、鈣、鎂和多種維生素等營養(yǎng)成分,是海參養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)中理想的天然飼料,其中海帶生物降解法即酶解,是用專一性糖苷酶或非專一性酶通過特異性開裂多糖中的某一糖苷鍵,對多糖進(jìn)行酶解,是國內(nèi)外學(xué)者的研究熱點。
本研究探究酶解海帶產(chǎn)物對海參體質(zhì)量及免疫相關(guān)酶活性的影響。為研制具有免疫調(diào)節(jié)功能的綠色海參餌料奠定基礎(chǔ)。
1 材料與方法
原料:假單胞菌H0-5、海參。
酶解方法:利用菌株H0-5產(chǎn)酶對海帶進(jìn)行降解,收集粗酶液,加入處理好的海帶,經(jīng)過濾得到上清,后經(jīng)噴霧干燥制取海帶寡糖粉末;所得沉淀經(jīng)冷凍干燥制成海帶泥粉末。
海參養(yǎng)殖:將購買的健康海參分為10組,飼養(yǎng)于水池中,觀察穩(wěn)定后展開實驗。實驗分為海帶泥組、海帶寡糖組和對照組。對照組飼喂100%基礎(chǔ)海參飼料,海帶寡糖組飼喂含不同含量(0.5%、2.5%、5.0%、10.0%)海帶寡糖的基礎(chǔ)飼料,海帶泥組飼喂含不同含量(25%、50%、75%、100%)海帶泥的基礎(chǔ)飼料。實驗過程中每10 d記錄海參質(zhì)量,5個循環(huán)后解剖海參,測定海參體壁組織液中免疫相關(guān)因子(SOD、CAT、POD、ACP、AKP、MDA)。
海參生長率計算公式如下:
生長率=((飼喂后質(zhì)量-飼喂初質(zhì)量)/養(yǎng)殖時間)×100%
2 結(jié)果與分析
海帶寡糖及海帶泥對海參質(zhì)量增長的影響:
由圖1可知,酶解海帶寡糖對海參生長具有極顯著的促進(jìn)作用( P <0.01),在合理添加范圍內(nèi)(≤10%),海參體質(zhì)量長率隨海帶寡糖添加量的增加而增加。海帶泥的促增長作用明顯弱于海帶寡糖,且基礎(chǔ)飼料成分比例過低(≤20%)時,海參的生長率反而下降。
海帶寡糖及酶解海帶泥對海參體壁組織超氧化物歧化酶活力影響:
由圖2可知,酶解海帶產(chǎn)物均能提高海參體壁組織中SOD活力,其中0.5%海帶寡糖組能夠顯著提高海參體壁組織中SOD活力( P <0.05)。
海帶寡糖及酶解海帶泥對海參體壁組織中過氧化氫酶活力的影響:
由圖3可知,酶解海帶寡糖和酶解海帶泥均能夠保護(hù)海參免受氧化損傷的作用。
海帶寡糖及酶解海帶泥對海參體壁組織內(nèi)過氧化物酶活力影響:
由圖4可知,酶解海帶寡糖添加量為5%時海參體壁組織中POD有最大活力,但酶解海帶泥對海參體壁組織中POD活力均無顯著影響( P >0.05)。
海帶寡糖及酶解海帶泥對海參體壁組織堿性磷酸酶和酸性磷酸酶活力的影響:
由圖5可知,與對照組相比海帶寡糖對海參體內(nèi)ACP和AKP的產(chǎn)生都有顯著的促進(jìn)作用( P <0.01),但是酶活與添加量呈負(fù)劑量依賴性。
海帶寡糖及酶解海帶泥對海參體內(nèi)丙二醛含量影響:
由圖6可知,海帶寡糖及海帶泥均能顯著性抑制機(jī)體內(nèi)過氧化反應(yīng),從而保護(hù)機(jī)體免受氧化損傷。
3 結(jié)論
本實驗通過研究不同添加劑量的酶解海帶寡糖和酶解海帶泥對海參體質(zhì)量及海參體壁液中免疫相關(guān)因子活力的影響,結(jié)果表明,酶解海帶寡糖及酶解海帶泥對海參體質(zhì)量增長均有一定的促進(jìn)作用,其中海帶寡糖的促進(jìn)作用高于海帶泥,其促進(jìn)作用與添加劑量呈正相關(guān)。海帶寡糖對海參體壁中免疫相關(guān)因子活力有一定的提高作用,其中0.5%添加量的海帶寡糖的作用最顯著。結(jié)果表明,酶解海帶寡糖作為海參廉價高效的免疫增強(qiáng)劑和飼料添加劑具有一定的應(yīng)用前景。